VEGF-165及HβD3双基因质粒载体及其构建方法

摘要：

本发明涉及一种VEGF-165及HβD3双基因质粒载体及其构建方法，利用pVIVO1-mcs质粒载体系统，采用酶切重组的方式，将人牙龈组织中获得HβD3cDNA和白血病细胞(HL-60)中获得VEGF165cDNA构建成重组质粒pVIVO1-mcs-VEGF165-HβD3。本发明将特异性促进上皮细胞增殖的VEGF和能抗细菌、抗真菌并能中和毒素的HβD3重组在同一载体上共同表达，将其应用于创伤愈合，既能促进创面上皮修复，又能增强创伤内环境免疫，达到“双管齐下”。本发明将在创伤愈合的基因治疗和组织工程研究领域发挥重要作用，具有广阔的应用前景。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201010289310.1

申请日期：2010-09-21

公开/公告号：CN102031268A

公开/公告日：2011-04-27

主分类号：C12N15/63(2006.01)I

申请/专利权人:中国人民解放军第三军医大学第一附属医院

发明/设计人:张从纪;夏章权

主申请人地址:400038 重庆市沙坪坝区高滩岩30号

国别省市代码:重庆;85

权利要求：

VEGF?165及HβD3双基因质粒载体，其特征在于：所述重组质粒载体包括人VEGF?165cDNA，和人HβD3cDNA，其中VEGF?165cDNA基因序列为：CCGCCTCGGCTTGTCACATCTGCAAGTACGTTCGTTTAACTCAAGCTGCCTCGCCTTGCAACGCGAGTCTGTGTTTTTGCAGGAACATTTACACGTCTGCGGATCTTGTACAAACAAATGCTTTCTCCGCTCTGAGCAAGGCCCACAGGGATTTTCTTGTCTTGCTCTATCTTTCTTTGGTCTGCATTCACATTTGTTGTGCTGTAGGAAGCTCATCTCTCCTATGTGCTGGCCTTGGTGAGGTTTGATCCGCATAATCTGCATGGTGATGTTGGACTCCTCAGTGGGCACACACTCCAGGCCCTCGTCATTGCAGCAGCCCCCGCATCGCATCAGGGGCACACAGGATGGCTTGAAGATGTACTCGATCTCATCAGGGTACTCCTGGAAGATGTCCACCAGGGTCTCGATTGGATGGCAGTAGCTGCGCTGATAGACATCCATGAACTTCACCACTTCGTGATGATTCTGCCCTCCTCCTTCTGCCATGGGTGCAGCCTGGGACCACTTGGCATGGTGGAGGTAGAGCAGCAAGGCAAGGCTCCAATGCACCCAAGACAGCAGAAAGTTCAT；HβD3cDNA基因序列为：ATGAGGATCCATTATCTTCTGTTTGCTTTGCTCTTCCTGTTTTTGGTGCCTGTTCCAGGTCATGGAGGAATCATAAACACATTACAGAAATATTATTGCAGAGTCAGAGGCGGCCGGTGTGCTGTGCTCAGCTGCCTTCCAAAGGAGGAACAGATCGGCAAGTGCTCGACGCGTGGCCGAAAATGCTGCCGAAGAAAGAAATAA。