NPM1基因突变的联合检测方法及诊断试剂盒

摘要：

本发明公开了一种核磷蛋白NPM1基因突变的联合检测方法及诊断试剂盒，通过对NPM1突变基因NPM1-mutA、NPM1-mutB、NPM1-mutD设计引物和探针，将探针与微球共价结合形成的探针微球混合物，与逆转录PCR扩增产物杂交，加入链霉亲和素藻红蛋白后，可检测出不同微球的荧光信号，从而确定待检测样品中是否含有NPM1基因突变及突变基因的表达状况。本发明所述的方法及试剂盒具有高灵敏度、高通量性、检测快速、准确等优点，能够对NPM1基因突变进行定性和定量检测，为急性髓系白血病(AML)和骨髓增生异常综合症(MDS)的早期诊断、复发、治疗方案的确定以及预后的判断提供重要的参考依据。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201010202653.X

申请日期：2010-06-17

公开/公告号：CN101955994A

公开/公告日：2011-01-26

主分类号：C12Q1/68(2006.01)I

申请/专利权人:江苏迈迪基因生物科技有限公司

发明/设计人:邵棠;陈鸣

主申请人地址:214192 江苏省无锡市锡山经济开发区芙蓉中三路99号科技创业园530大楼305

专利代理机构:上海浦一知识产权代理有限公司 31211

代理人:王函

国别省市代码:江苏;32

权利要求：

一种NPM1基因突变的联合检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)包含多种不同荧光编码的羧基微球Beads，每种微球上分别共价结合针对NPM1的多种突变基因的mRNA所设计的特异性核酸探针；所述的NPM1的多种突变基因包含以下任意一种基因或任意组合的多种基因：NPM1?mutA、NPM1?mutB和NPM1?mutD；(2)针对NPM1的多种突变基因的mRNA，分别设计上下游引物，对不同的突变基因的mRNA，通过逆转录PCR扩增出相应的产物；(3)含有特异性核酸探针的微球与NPM1突变基因mRNA的逆转录扩增产物混合杂交，加入链霉亲和素?藻红蛋白Streptavidin?PE后，通过液相芯片xMAP方法检测荧光信号；(4)将检测到的荧光信号与内参基因的荧光信号进行比较，从而确定检测样品中是否存在NPM1突变基因，和/或样品中突变基因的表达状况。