H5亚型禽流感病毒变异株的多重PCR检测方法

摘要：

本发明涉及一种多重PCR检测H5亚型禽流感病毒变异株的方法。该方法是利用3对引物对相应靶基因进行RT-PCR扩增，PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳，然后根据电泳结果进行判定：A型流感毒株出现300bp的型特异条带，H5亚型流感病毒出现173bp的亚型特异条带，变异株出现559bp的特异条带。为禽流感和变异株的快速诊断提供了新的方法，为疫苗的选择提供指导作用。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201010180500.X

申请日期：2010-05-21

公开/公告号：CN101875979A

公开/公告日：2010-11-03

主分类号：C12Q1/70(2006.01)I

申请/专利权人:扬州大学

发明/设计人:彭大新;刘秀梵;吴艳涛;陈素娟;张小荣;徐全刚;刘金彪

主申请人地址:225009 江苏省扬州市大学南路88号

专利代理机构:南京知识律师事务所 32207

代理人:卢亚丽

国别省市代码:江苏;32

权利要求：

一种H5亚型禽流感病毒变异株的多重PCR检测方法，其特征是从待检禽的气管或泄殖腔试子或血液或器官组织或尿囊液中提取全基因组RNA，再以RNA为模板，以AIV基质蛋白(M)、血凝素(H5)基因为靶基因设计型特异性引物、亚型特异性引物和鉴定变异株的引物进行RT-PCR扩增，PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳，然后根据电泳结果进行判定；M1?????5′-ATTGGGACTCATCCTAACTCTA-3′M2?????5′-CGTCAACATCCACAGCACTC-3′HA1????5′-ATRCCATTYCACAACATACACC-3′HA2????5′-TCCYTGCCATCCTCCCTC-3′HA3????5′-TAATACATACCCACCAATAAAGGTGA-3′HA2????5′-TCCYTGCCATCCTCCCTC-3′其中，R为A或G；Y为C或T。