Canine-SLAM/Vero细胞系及构建方法
本发明提供了一种Canine-SLAM/Vero细胞系及构建方法,采集犬瘟热阳性犬抗凝血,应用犬淋巴细胞分离液分离外周血淋巴细胞,提取总RNA,通过PCR方法获得犬SLAM基因;构建pCAGGS-Neo/SLAM质粒;将构建的pCAGGS-Neo/SLAM表达盒转染到Vero细胞中,采用G418筛选稳定表达SLAM的细胞系;利用间接免疫荧光法鉴定和检测SLAM在细胞膜表面的表达情况,得到细胞系。本发明不但可用于犬瘟热病毒的分离和病毒的滴定,而且还显著缩短分离病毒的时间和提高了病毒的产量,有力地推动了对犬瘟热病毒表现型和遗传型等分子特征的研究。
发明专利
CN201010155790.2
2010-04-21
CN101851607A
2010-10-06
C12N5/10(2006.01)I
中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
高玉伟;刘玉秀;夏咸柱;杨松涛;黄耕;王承宇;侯小强;王铁成;冯娜
130062 吉林省长春市青龙路1068号
吉林长春新纪元专利代理有限责任公司 22100
陈宏伟
吉林;22
一种Canine-SLAM/Vero细胞系,其特征在于:Vero细胞中转染含犬SLAM的真核表达载体,细胞表面稳定表达有犬瘟热病毒受体SLAM。