α干扰素类似物的蛋白制备方法
本发明涉及一种α干扰素类似物的蛋白制备方法,其包括步骤:(1)将编码α干扰素类似物蛋白的基因克隆到表达载体后所形成的重组质粒转化到宿主菌中构建成工程菌,再将所述工程菌进行发酵培养,所述编码α干扰素类似物蛋白的基因的核甘酸序列为SEQ?ID?NO1或者与SEQ?ID?NO?1的同源性不小于93%的核苷酸序列;(2)诱导所述发酵培养的工程菌表达目标蛋白;(3)纯化目标蛋白,所述纯化步骤为破碎经诱导的工程菌、离心破碎后菌体、稀释上清液和层析。由于本发明纯化过程中的层析在不同的条件下采用不同的多步层析顺序,有效地提高了蛋白的纯度和蛋白的活性总收率,降低了试验成本,减少了目标蛋白的损失。
发明专利
CN201010102288.5
2010-01-27
CN101948844A
2011-01-19
C12N15/21(2006.01)I
杰华生物技术(北京)有限公司
刘龙斌;王海涛;王敏荣;张福强;赵岩
100102 北京市朝阳区利泽中二路望京科技园F座5层
北京市卓华知识产权代理有限公司 11299
申率
北京;11
一种α干扰素类似物的蛋白制备方法,其特征在于包括步骤:(1)将编码α干扰素类似物蛋白的基因克隆到表达载体后所形成的重组质粒转化到宿主菌中构建成工程菌,再将所述工程菌进行发酵培养,所述编码α干扰素类似物蛋白的基因的核甘酸序列为SEQ?IDNO?1或者与SEQ?ID?NO?1的同源性不小于93%的核苷酸序列;(2)诱导所述发酵培养后的工程菌表达目标蛋白;(3)纯化所述目标蛋白,纯化步骤为破碎经诱导的工程菌、离心破碎后的菌体、稀释上清液、层析和收集含目标蛋白的样品。