5'-酰化胞苷的制备方法及在制备治疗心脏病、肝病药物中的应用
本发明公开一种5’-酰化胞苷的制备方法及在制备治疗心脏病、肝病药物中的应用,具体制备方法是将核糖核酸粉溶解、酶解,并将酶解液进行超滤纯化并进行阴离子树脂柱交换分离、纳滤、离心得到5’-胞苷;将5’胞苷与20%盐酸反应,以制备成盐酸胞苷,将盐酸胞苷溶于N,N二甲基甲酰胺液中,然后加入等克分子当量的酸氯,于室温条件下搅拌混合液过夜,于真空条件下浓缩混合液呈油状物,与体积比为1∶1的二乙酰乙酯一起研磨生成二乙基酯;然后再与与二乙基酯等当量的碳酸氢钠研磨,收集固体结晶,用水洗涤,干燥重结晶,得到5’-酰化胞苷。
发明专利
CN200910220259.6
2009-11-30
CN101792788A
2010-08-04
C12P19/38(2006.01)I
珍奥集团股份有限公司
陈玉松;李恕;刘庆莹;石维
116620 辽宁省大连市双D港生命一路88号
大连非凡专利事务所 21220
闪红霞
辽宁;21
一种5’-酰化胞苷的制备方法,其特征在于按如下步骤进行:a.将核糖核酸RNA粉置于60℃水中溶解并控制PH值5.0~5.5,完全溶解后,升温至90~95℃,保持1小时后冷却降温至70℃;b.加入RP1酶,保持温度至68~70℃酶解12小时,升温至90~95℃使酶失活;c.酶解液冷却降温至30℃~35℃,将酶解液进行超滤纯化,得到超滤液;d.将超滤液进行阴离子树脂柱交换分离,先用纯水透洗树脂柱,直至流出液紫外吸收值OD260×稀释倍数<20时,结束水洗;再用0.2M甲酸溶液清洗,当流出液紫外吸收值OD279×稀释倍数≥20且OD280/OD260大于1.7时,开始收集流出液,直至流出液紫外吸收值OD279×稀释倍数<20,结束收集;e.将收集液调pH值5.0~6.0,通过纳滤浓缩至浓度120g/L,用盐酸调PH值2.0~2.5进行结晶,12小时后,离心得到5’-胞苷;f.将5’胞苷与20%盐酸反应,制备成盐酸胞苷,将盐酸胞苷溶于N,N二甲基甲酰胺液中,然后加入等克分子当量的酸氯,于室温条件下搅拌混合液过夜,于真空条件下、室温浓缩混合液呈油状物,将经浓缩的混合液与二乙酰乙酯1∶1一起研磨生成二乙基酯;然后再与与二乙基酯等当量的碳酸氢钠研磨,收集固体结晶,用水洗涤,干燥重结晶,得到5’-酰化胞苷。