rpsL基因和多克隆位点融合的新型克隆载体
本发明涉及一个rpsL基因和多克隆位点序列融合的新型克隆载体pLS975。该载体是首先通过重叠延伸PCR手段将一个多克隆位点序列插入至rpsL基因的启动子和开放阅读框之间,再将此DNA片段克隆至去除了多克隆位点序列的高拷贝质粒pBluescript?KS(-)而获得。在pLS975中,多克隆位点序列和rpsL基因是在读码框内融合,此融合基因保留了rpsL基因的负筛选标记的功能。pLS975为高拷贝的氨苄青霉素抗性载体,共有18个酶切位点可用于外源DNA片段的克隆,以氨苄青霉素抗性和和1mg/ml的链霉素进行重组克隆的筛选。以本载体进行基因克隆操作简便,重组效率高(96%~100%),可成为通用的克隆载体。
发明专利
CN200910206273.0
2009-10-16
CN101696416
2010-04-21
C12N15/63(2006.01)I
南京师范大学
尚广东;马超;任杰
210046 江苏省南京市亚东新城区文苑路1号
南京知识律师事务所 32207
卢亚丽
江苏;32
一个rpsL基因和多克隆位点融合的新型克隆载体pLS975,其结构如图2所示。