O157:H7大肠菌的环介导等温扩增快速检测试剂盒及方法
本发明提供了一种O157:H7大肠菌的环介导等温扩增快速检测试剂盒。本发明针对O157:H7的O抗原编码rfbE、志贺样毒素stx2、H鞭毛抗原编码flic基因分别设计LAMP引物，提供一种特异性强、灵敏度高的O157:H7大肠菌的环介导等温扩增快速检测试剂盒及检测方法。本发明有益效果主要体现在：(1)不需要使用昂贵、精密的仪器设备，仅需一金属裂解仪/恒温水浴装置；(2)耗时短，在恒温条件下进行反应，1小时左右即可完成；(3)白光下通过肉眼目测反应体系颜色变化即可进行结果判断，操作简便；(4)本发明方法简易、快速、特异、敏感，在快速检测方面有着较为广泛的应用前景。
发明专利
CN200910096030.6
2009-01-23
CN101487057
2009-07-22
C12Q1/68(2006.01)I
浙江省疾病预防控制中心
朱水荣
310051浙江省杭州市滨江区信诚路630号
杭州天正专利事务所有限公司
黄美娟%冷红梅
浙江;33
1. O157：H7大肠菌的环介导等温扩增快速检测试剂盒，主要包括特异性扩增引物、Bst DNA聚合酶、脱氧核糖核苷酸混合物、PCR缓冲液，其特征在于：所述特异性扩增引物序列如下：rfbE FIP：CTCTCTTTCCTCTGCGGTCCGATGTTTTTCACACTTATTGGAT；rfbE BIP：TAAGGAATCACCTTGCAGATAAACTAGTACATTGGCATCGTGT；rfbE F3：AACAGTCTTGTACAAGTCCA；rfbE B3：GGTGCTTTTGATATTTTTCCG；rfbE LB：CGAAACAAGGCCAGTTTTTTACC；stx2 FIP：GGTTAATAACAGACACCGATGTGGACAGAGATATCGACCCCT；stx2 BIP：TAAGGAATCACCTTGCAGATAAACTAGTACATTGGCATCGTGT；stx2 F3：GTCTCTTCGTTAAATAGTATACGG；stx2 B3：GGCCACATATAAATTATTTTGCTC；flic FIP：GCCGGATACGCGGTCAATTTCACTCCGATTCTGACCTGGACT；flic BIP：TGAACGTGCTGGCGAAAGACGTTTCAGGTCGATCGTGATGG；flic F3：GAACTGACGGTTCAGGCC；flic B3：AGCCATTCAGACCCAGAGT。