BmNPV-家蚕幼虫多基因表达系统构建方法

摘要：

本发明涉及一种BmNPV-家蚕幼虫多基因表达系统构建方法，按下列步骤顺序完成：(1)将阿拉伯糖启动子(pBAD)控制的I-SceI表达盒重组到E.coli DH10B的基因组中获得新的受体菌I-SceI DH10B；(2)结合转移用供体质粒的构建；(3)cre/loxp重组位点取代BmBacmid基因组中的v-cath和chitin基因，2个I-SceI位点取代BmBacmid中的p70基因获得受体I-sceI BmMultibac；(4)利用cre-loxp重组、Tn7重组和结合转移三种方法引入外源基因；(5)常规方法制备重组Bacmid DNA并转染昆虫细胞或者注射家蚕幼虫。本发明获得BmNPV-家蚕幼虫多基因表达系统，为研究多亚基蛋白、蛋白与蛋白之间相互作用以及制备病毒样颗粒奠定基础。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200810140645.X

申请日期：2008-07-16

公开/公告号：CN101372697

公开/公告日：2009-02-25

主分类号：C12N15/866(2006.01)I

申请/专利权人:南阳师范学院

发明/设计人:姚伦广;张二辉;孙京臣;阚云超;刘宗才;刘 飞

主申请人地址:473061河南省南阳市卧龙路1386号南阳师范学院

专利代理机构:郑州红元帅专利代理事务所（普通合伙）

代理人:徐皂兰

国别省市代码:河南;41

权利要求：

1.一种BmNPV—家蚕幼虫多基因表达系统构建方法，其特征在于：该构建方法按下列步骤顺序完成：(1)将阿拉伯糖启动子(pBAD)控制的I-SceI表达盒重组到E.coli DH10B的基因组中获得新的受体菌I-SceI DH10B；(2)结合转移用供体质粒的构建；(3)cre/loxp重组位点取代BmBacmid基因组中的v-cath和chitin基因，2个I-SceI位点取代BmBacmid中的p10基因获得受体I-sceI BmMultibac；(4)利用cre-loxp重组、Tn7重组和结合转移三种方法引入外源基因；(5)常规方法制备重组Bacmid DNA并转染昆虫细胞或者注射家蚕幼虫。