D-氨甲酰水解酶的突变体及其应用

摘要：

本发明公开了D-氨甲酰水解酶的突变体及其在生产D-对羟基苯甘氨酸中的应用。通过定向进化技术获得的一个突变体在D-氨甲酰水解酶的第12位的谷氨酰胺突变为非极性氨基酸，另一突变体在D-氨甲酰水解酶的第263位的苏氨酸突变为甲硫氨酸，第三个突变体在D-氨甲酰水解酶的第263位的苏氨酸突变为丝氨酸，第四个突变体在D-氨甲酰水解酶的第12位的谷氨酰胺突变为苏氨酸，且第263位的苏氨酸突变为丝氨酸。所述突变体酶在D-对羟基苯甘氨酸的生产中表现出更高的热稳定性和酶活力，表明采用定向进化技术改造工业用酶是一个十分有效的手段。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200810035067.3

申请日期：2008-03-25

公开/公告号：CN101544969

公开/公告日：2009-09-30

主分类号：C12N9/78(2006.01)I

申请/专利权人:中国科学院上海生命科学研究院

发明/设计人:杨 晟;余 宏;李 键;张大龙;姜卫红;杨蕴刘

主申请人地址:200031上海市徐汇区岳阳路320号

专利代理机构:上海智信专利代理有限公司

代理人:缪利明

国别省市代码:上海;31

权利要求：

1、一种D-氨甲酰水解酶的突变体，其特征在于，具有以下任一项所述的氨基酸序列：A：D-氨甲酰水解酶的氨基酸序列中第12位的谷氨酰胺突变为非极性氨基酸；B：D-氨甲酰水解酶的氨基酸序列中第263位的苏氨酸突变为甲硫氨酸；C：D-氨甲酰水解酶的氨基酸序列中第263位的苏氨酸突变为丝氨酸；D：D-氨甲酰水解酶的氨基酸序列中第12位的谷氨酰胺突变为苏氨酸，且第263位的苏氨酸突变为丝氨酸。