一种ShRNA的克隆方法

摘要：

本发明提供了一种ShRNA的克隆方法和一种用于ShRNA克隆的载体。所述的克隆方法包括制备合适的载体，将载体和双链DNA片段连接得到环形的DNA分子，将连接得到的DNA分子转化细菌，通过筛选得到正确的基因克隆等步骤；所述的载体两端具有碱基序列相同的且同为5’端或3’端的突出端，同时，所述的寡核苷酸两端也具有碱基序列相同的且同为5’端或3’端的突出端，且所述载体的突出端碱基序列与所述寡核苷酸片段突出部分的碱基序列互补配对。利用本发明提供的载体以及ShRNA克隆方法，只需合成一种寡核苷酸片段，便可以方便、迅速地实现ShRNA克隆，不仅简化了操作，而且成功率高。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200710006862.5

申请日期：2007-02-01

公开/公告号：CN101024830

公开/公告日：2007-08-29

主分类号：C12N15/10(2006.01)I

申请/专利权人:王鸿艳

发明/设计人:邱文英

主申请人地址:201203上海市浦东张江碧波路573弄13号904室

专利代理机构:上海智信专利代理有限公司

代理人:缪利明

国别省市代码:上海;31

权利要求：

1、一种ShRNA的克隆方法，包括制备合适的载体，将载体和双链DNA片段连接得到环形的DNA分子，其特征在于：只合成一种寡核苷酸片段，该寡核苷酸片段由回文结构部分和突出部分两部分组成，两条所述寡核苷酸片断在退火后能够通过回文结构互补配对而形成双链DNA片段；所述载体的两端具有碱基序列相同的突出端，且同为5’端或3’端的突出端；所述寡核苷酸片段突出部分的碱基序列与所述载体的突出端碱基序列互补配对。