一种制备高纯度凝血酶的方法

摘要：

本发明提供了一种从低纯度凝血酶制备高纯度凝血酶的方法。该方法是利用层析介质吸附低纯度凝血酶溶液，对层析柱进行洗脱，收集凝血酶蛋白峰，再经凝胶层析，超滤脱盐浓缩，最后冻干得高纯度凝血酶成品。该方法在常温常压下进行，工艺环保，生产周期短；凝血酶提取效率高，由本发明制备高纯度凝血酶，其得率为80％以上；操作简单，本发明仅需离心、离子交换层析、凝胶层析、超滤脱盐浓缩和冻干等几个步骤，容易实现工业化生产。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200610078799.1

申请日期：2006-05-12

公开/公告号：CN1844380

公开/公告日：2006-10-11

主分类号：C12N9/74(2006.01)I

申请/专利权人:黄耀江

发明/设计人:黄耀江;王永成;裴 靖

主申请人地址:100176北京市经济技术开发区中和街5号2楼

国别省市代码:北京;11

权利要求：

1、一种制备高纯度凝血酶的方法，该方法包括以下几个步骤：(1)、将低纯度凝血酶用缓冲剂溶解，离心分离，收集上清液；(2)、将上清凝血酶溶液上阳离子层析柱层析，对层析柱进行洗脱，收集凝血酶蛋白峰，得凝血酶溶液；(3)、将步骤(2)中得到的凝血酶溶液上凝胶柱，对凝胶柱进行洗脱，收集凝血酶蛋白峰，得到高纯度的凝血酶溶液；(4)、将高纯度凝血酶溶液进行超滤脱盐浓缩，得高纯度凝血酶浓缩液；(5)、将高纯度凝血酶浓缩液冻干，即得白色的粉状高纯度凝血酶成品。