一步法核糖核酸抽提试剂
本发明涉及一种一步法核糖核酸抽提试剂EZRNA,其配方以1L总量计:异硫氰酸胍3~5M,柠檬酸钠18~25M,月硅酸钠按重量百分比计为0.3~0.6%,2-巯基乙醇0.6~1.2M,平衡酸性苯酚按体积百分比计为40~55%。抽提的工艺过程是:液氮中碾磨后的组织离去上清液;加入一步法核糖核酸抽提试剂,反复抽吸混匀;加入糖原,剧烈振荡,匀浆;用针筒抽吸,剪切脱氧核糖核酸;加入氯仿与异戊醇混合物或氯仿,剧烈振荡,离心;上清液中加入异丙醇,静置,离心,移去上清液;沉淀用酒精洗涤,离心,移去上清液;真空离心干燥,挥发酒精;沉淀物用焦碳酸二乙酯去离子水溶解。其优点在于:成本为进口产品的1/10,无须低温保存,抽提过程中不浪费核糖核酸。
发明专利
CN200610029556.9
2006-07-31
CN1904044
2007-01-31
C12N15/10(2006.01)I
捷瑞生物工程(上海)有限公司
赫英俊;李正友;邵永胜;肖爱军
200233上海市徐汇区宜山路825号1号楼4楼
上海东亚专利商标代理有限公司
董 梅
上海;31
权利要求书1、一种一步法核糖核酸抽提试剂,以1升总量计,其配方是:异硫氰酸胍3~5M,柠檬酸钠18~25M,月硅酸钠按重量百分比计为0.3~0.6%,2-巯基乙醇0.6~1.2M,平衡酸性苯酚按体积百分比计为40~55%。