一种能降解氯酚的厌氧菌的筛选方法
一种能降解氯酚的厌氧菌的筛选方法，即一种涉及培养、筛选具有生物降解氯酚功能的厌氧菌的方法，利用厌氧手套箱以及多种改进的新型培养基培养筛选出一株具有高效降解氯酚和耐酸特征的厌氧菌，其工艺如下：A.厌氧颗粒污泥的筛选；B.细菌分离和纯化；C.降解氯酚的厌氧菌的初筛；D.降解氯酚的厌氧菌的复筛：采用固体-液体培养基交替培养方法进行分离和纯化，直到从细胞形态鉴定确认为单一菌体为止。本发明操作简便，具有重大的理论意义和经济价值。为氯酚废水的厌氧生物处理工程应用提供理论依据和指导。可广泛适用于氯酚类降解菌的分离、筛选和培养，为研究氯酚降解规律以及功能菌及其之间相互作用提供培养筛选良好的菌种的方法。
发明专利
CN200610023535.6
2006-01-23
CN1827765
2006-09-06
C12N1/20(2006.01)I
同济大学
陈 玲;张 文;傅以钢;黄爱群;夏四清
200092上海市四平路1239号
上海德昭知识产权代理有限公司
陈龙梅
上海;31
1.一种能降解氯酚的厌氧菌的筛选方法，其特征在于：它是从厌氧颗粒污泥中进行筛选的，并按照下述步骤进行：A.厌氧颗粒污泥的筛选：选择色泽乌黑、颗粒较大的厌氧污泥，用8mm孔筛筛选出直径大于8mm的颗粒污泥。B、降解氯酚的厌氧颗粒污泥驯化：接种A步的厌氧颗粒污泥到UASB厌氧反应器进行驯化，对驯化后得到的颗粒污泥内生物菌群采用稀释倍数法和固体培养基平板涂布确定颗粒污泥菌液的接种浓度，并进行细菌分离和纯化；C、降解氯酚的厌氧菌的初筛：对分离和纯化得到的菌体用生理盐水或灭菌蒸馏水溶解，成为菌液，将菌液接种到液体培养基上，富集培养，其中液体培养基中加入氯酚；D、降解氯酚的厌氧菌的复筛：取初筛得到的菌液接种到固体培养基中涂布培养，待长出菌体后，用灭菌针挑出菌落接种到液体培养基中，待液体培养基中长出菌株后，摇匀菌液，将菌液接种到固体培养基进行形态鉴定，或进行显微镜观察和鉴定细胞形态是否相同来判断分离纯化是否成功，如果菌体不纯，继续采用固体-液体培养基交替培养方法进行分离和纯化，直到从细胞形态鉴定确认为单一菌体为止。