一种戊二酰-7-氨基头孢烷酸酰化酶的固定化方法

摘要：

本发明提供了一种戊二酰-7-氨基头孢烷酸酰化酶的固定化方法，属于生物酶工程技术领域。工艺步骤为：培养并收集具有戊二酰-7-氨基头孢烷酸酰化酶活性的游离细胞；收集得到的游离细胞重悬于pH 6～9缓冲溶液中，然后加入终浓度为5～100mmol/L的交联剂；0～45℃下，交联1～4小时，离心，所得固体用缓冲液冲洗，得到以游离态菌为载体的固定化戊二酰-7-氨基头孢烷酸酰化酶。本发明的优点在于：与传统的固定化酶、固定化细胞方法相比，具有明显的优势，结合膜分离工艺，展现了强有力的工业应用前景。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200610011742.X

申请日期：2006-04-18

公开/公告号：CN1844383

公开/公告日：2006-10-11

主分类号：C12N11/16(2006.01)I

申请/专利权人:北京科技大学%清华大学

发明/设计人:罗 晖;史芫芫;于慧敏;李 强;沈忠耀

主申请人地址:100083北京市海淀区学院路30号100083

专利代理机构:北京科大华谊专利代理事务所

代理人:刘月娥

国别省市代码:北京;11

权利要求：

1、一种戊二酰-7-氨基头孢烷酸酰化酶的固定化方法，其特征在于：a、培养并收集具有戊二酰-7-氨基头孢烷酸酰化酶活性的游离细胞；b、将步骤a中收集得到的游离细胞重悬于pH6.0～9.0缓冲溶液中，然后加入终浓度为5～100mmol/L的交联剂；0～45℃下，交联1～4小时，离心，所得固体用缓冲液冲洗，得到以游离态菌为载体的固定化GL-7-ACA酰化酶；c、在生产7-氨基头孢烷酸中的应用；所述的固定化酶与催化产物的分离以及固定化酶的重复使用，采用的是高速离心的方法收集固定化酶；或者采用中空纤维超滤膜分离的方法将固定化酶与催化产物分离。