一种昆虫抗冷冻蛋白基因序列及其表达纯化方法

摘要：

本发明公开了一种昆虫抗冷冻蛋白基因，其序列为SEQ ID NO：1。本发明还提供了该昆虫抗冷冻蛋白基因的克隆、蛋白表达及纯化方法，主要包括以下步骤：利用特异性引物扩增该昆虫抗冷冻蛋白基因，与原核生物表达元件PTYB11连接构建表达载体PTYB11-afp，转化表达菌株BL21，加入诱导剂诱导，以及纯化抗冷冻蛋白。运用本发明所述的方法成功地克隆到了昆虫抗冷冻蛋白基因。诱导表达的抗冷冻蛋白占菌体总蛋白的30％，通过介质纯化后得到的抗冷冻蛋白纯度达95％以上，说明本发明提供的方法是高效的。而且，用本发明所述的表达系统得到的融合蛋白不需要内切酶即可切除标签蛋白，不含多余的氨基酸序列，更接近天然蛋白活性。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200510126417.3

申请日期：2005-12-08

公开/公告号：CN1800393

公开/公告日：2006-07-12

主分类号：C12N15/12(2006.01)I

申请/专利权人:华南农业大学

发明/设计人:郭丽琼;林俊芳;陈小萍

主申请人地址:510642广东省广州市天河区五山路483号

专利代理机构:北京路浩知识产权代理有限公司

代理人:向 华

国别省市代码:广东;44

权利要求：

1、一种昆虫抗冷冻蛋白基因，其序列为SEQIDNO：1。