五叶地锦胚乳原生质体分离与培养技术

摘要：

本发明涉及以五叶地锦胚乳原生质体分离与培养技术，包括五个培养阶段：(1)五叶地锦幼果胚乳切块诱导愈伤组织。(2)得到的愈伤组织2次继代培养获得无色至淡灰白色，松软，易散，细胞圆形，胞质浓的愈伤组织。(3)愈伤组织以纤维素酶(cellulase R-10)、果胶酶(Pectolyase Y23)、甘露醇组合酶解8小时，获得胚乳愈伤原生质体为1.18×106个/g。(4)获得的原生质体经液体浅层培养、固液结合培养、固体培养三种方式培养，原生质体再生细胞壁形成了新的愈伤组织，新愈伤组织转入固体培养基中。(5)所获得细胞团继代培养，获得生长旺盛的愈伤组织。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200510090497.1

申请日期：2005-08-17

公开/公告号：CN1752206

公开/公告日：2006-03-29

主分类号：C12N5/04(2006.01)I

申请/专利权人:中国林业科学研究院林业研究所

发明/设计人:孙振元;李正红;江泽慧;巨关升;韩 蕾;杨学军;李 云

主申请人地址:100091北京市万寿山后中国林业科学研究院林业研究所

国别省市代码:北京;11

权利要求：

1.五叶地锦胚乳原生质体分离与培养技术，其特征在于以盛花期35-45天后五叶地锦幼果胚乳愈伤，进行原生质体分离与培养。