一种尖吻蝮蛇血凝酶制备方法与用途

摘要：

本发明公开了一种尖吻蝮蛇血凝酶的制备方法与用途。它包括溶解蛇毒、低温离心、透析、DEAE-Sepharose FF层析、透析、DEAE-SepharoseFF层析及Sephadex G25层析步骤。它从中国特有的尖吻蝮蛇蛇毒中分离纯化得到的尖吻蝮蛇血凝酶，是由A和B两个亚基组成，具有促进血液凝固和止血作用。A和B两个亚基的分子量为15.0KD和14.2KD。A亚基N端第一至25位的氨基酸序列为DCSSGWSSYEGHCYKVFKQSKTWTA，B亚基N端第一至25位的氨基酸序列为DCPSDWSSYECHCYKPDEPKTWEDA。尖吻蝮蛇血凝酶可用于临床上人的各种类型出血的止血。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200510085173.9

申请日期：2005-07-25

公开/公告号：CN1766100

公开/公告日：2006-05-03

主分类号：C12N9/74(2006.01)I

申请/专利权人:康辰医药发展有限公司

发明/设计人:王锡娟

主申请人地址:100085北京市海淀区上地三街九号嘉华大厦A座七层

国别省市代码:北京;11

权利要求：

1、一种尖吻蝮蛇血凝酶的制备方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：A.尖吻蝮蛇粗毒用磷酸缓冲液溶解离心，透析，经DEAE-Sepharose层析，不同溶液的NaCl溶液梯度洗脱，收集得到组分；B.再透析在经DEAE-Sepharose层析，得到精制的纯度尖吻蝮蛇血凝酶；C.收精制的尖吻蝮蛇血凝酶，经SephadexG25层析柱脱盐后，得到尖吻蝮蛇血凝酶原料药；D.收所得的尖吻蝮蛇血凝酶原料药加赋形剂过滤、分装和冷冻干燥，制得注射用尖吻蝮蛇血凝酶。