一种体外培养骨骼肌表达体系

摘要：

本发明涉及了一种体外培养骨骼肌表达体系，包括含目的基因的表达载体的构建、表达载体转染宿主细胞群及筛选、目的基因在宿主细胞中的表达和表达产物的分离纯化等步骤，其特征在于所述的表达载体是在pcDNA3.0基础上，构建的带有myc10检测标签及6×his纯化标签的表达载体；且在所述的表达载体中插入人基质金属蛋白酶9(MMP-9)信号序列。本发明在表达载体中插入了基质金属蛋白酶9(MMP-9)信号序列，增大了蛋白的分泌量；采用了QM7细胞作为宿主细胞表达蛋白，增大了蛋白的表达量；筛选出适合QM7细胞分化的无血清分化培养基，培养基造价低并且利于后期纯化工作，且为PEX作为重组蛋白药物进行大规模生产奠定了前期基础。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200510084355.4

申请日期：2005-07-19

公开/公告号：CN1724677

公开/公告日：2006-01-25

主分类号：C12N15/85(2006.01)I

申请/专利权人:北京市肿瘤防治研究所

发明/设计人:张志谦;宋 琳

主申请人地址:100034北京市西城区大红罗厂街1号

专利代理机构:北京中北商标专利事务所有限公司

代理人:吴 立

国别省市代码:北京;11

权利要求：

1、一种体外培养骨骼肌表达体系，主要包括含目的基因的表达载体的构建、表达载体转染宿主细胞群及筛选、目的基因在宿主细胞中的表达和表达产物的分离纯化、表达产物的活性检测的步骤，其特征在于所述的表达载体是在pcDNA3.0基础上，构建的带有myc10检测标签及6×his纯化标签的表达载体；且在所述的表达载体中插入人基质金属蛋白酶9(MMP-9)信号序列(见序列1)。