一种从海洋沉积物中同时提取微生物宏基因组DNA和总RNA的方法

摘要：

本发明提供一种从海洋沉积物中同时提取微生物宏基因组DNA和总RNA的方法，包括将海洋沉积物用变性溶液处理，加入沙子振荡，加入蛋白酶和溶菌酶进行裂解，再加入SDS和PVPP溶液进行进一步裂解，加入萃取剂进行处理，萃取液用异丙醇沉淀，最后用核酸吸附树脂进行纯化。该方法特别适用于从海洋沉积物中同时提取微生物宏基因组DNA和总RNA，同时也可应用于陆地土壤样品，陆地湖泊沉积物样品中微生物宏基因组DNA和总RNA的共提取。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200510079754.1

申请日期：2005-06-28

公开/公告号：CN1718738

公开/公告日：2006-01-11

主分类号：C12P19/34(2006.01)I

申请/专利权人:国家海洋局第三海洋研究所

发明/设计人:曾润颖;赵 晶

主申请人地址:361005福建省厦门市大学路178号

专利代理机构:厦门龙格专利事务所

代理人:张江涵

国别省市代码:福建;35

权利要求：

1.一种从海洋沉积物中同时提取微生物宏基因组DNA和总RNA的方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：(1)用变性溶液和沙子处理沉积物样品；(2)向上述步骤(1)处理后的样品中加入核酸提取缓冲液和酶进行裂解；(3)向上述步骤(2)的样品中加入SDS和PVPP溶液进行处理并离心得到上清液；(4)重复上述步骤(2)，(3)两次，收集三次离心得到的上清液；(5)向上述步骤(4)中的上清液中加入萃取剂进行处理并离心得到上层水相溶液；(6)向上述步骤(5)中的水相溶液中加入异丙醇沉淀并离心去除上清液，所得沉淀用水重新溶解，得到核酸物质粗提液；(7)向上述步骤(6)中的核酸物质粗提液中加入吸附树脂；(8)洗脱吸附于树脂上的核酸物质并离心得到含有核酸物质的滤液；(9)沉淀滤液中的DNA和RNA。