一种可检测和分型所有已知生殖道人乳头瘤病毒的方法

摘要：

本发明公开了一种检测和分型所有已知生殖道人乳头瘤病毒的方法。该方法能区分目前已知可感染生殖道粘膜的48型HPV及其常见混合感染，同时在保证敏感性、特异性的前提下，根据最佳选择、优化搭配的原则选出Rsa I、MseI、Pst I和HaeIII四个常用内切酶组合，并对照建立的生殖道HPV基因型MY09/11扩增产物RMPH酶切数据库进行HPV基因型的判断。此方法操作简单方便、省时，成本低，所需设备(PCR仪)已普及于县级医院，且费用极为低廉，可以进行高通量实验，这为在我国开展HPV感染的流行病学调查提供了技术上的可操作性。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200510062395.9

申请日期：2005-12-31

公开/公告号：CN1824803

公开/公告日：2006-08-30

主分类号：C12Q1/68(2006.01)I

申请/专利权人:浙江大学医学院附属妇产科医院

发明/设计人:陈怀增;叶 枫;谢 幸;吕卫国;洪 蝶;梁朝霞

主申请人地址:310006浙江省杭州市学士路1号

专利代理机构:杭州求是专利事务所有限公司

代理人:周 烽

国别省市代码:浙江;33

权利要求：

1.一种可检测和分型所有已知生殖道人乳头瘤病毒的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)宫颈分泌物或组织标本中提取DNA，作为PCR扩增的模板。(2)用共同引物MY09/11或其改进引物进行PCR扩增。(3)琼脂糖凝胶电泳判断PCR结果，出现442～458bp的电泳条带者为阳性。(4)用RsaI、MseI、PstI和HaeIII对阳性PCR产物分别进行酶切。(5)对各酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳，测量各酶切片段长度。(6)根据各酶的酶切产物的片段长度，对照生殖道HPV基因型MY09/11扩增产物RMPH酶切数据库进行HPV基因型的判断。