一种生产重组人骨形态发生蛋白的方法

摘要：

本发明涉及一种生产重组人骨形态发生蛋白的方法。该方法包括以下步骤：将发酵好的细菌破碎，分离包涵体并用变性剂裂解；将变性裂解的重组入骨形态发生蛋白复性，使其正确折叠成可溶的、并有生物活性的构象；用层析的方法纯化即得高纯度重组人骨形态发生蛋白。用本发明的方法生产重组人骨形态发生蛋白，具有得率高、生物活性好、纯度高、工艺简单、生产成本低廉等优点。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200510050610.3

申请日期：2005-07-07

公开/公告号：CN1757723

公开/公告日：2006-04-12

主分类号：C12N15/09(2006.01)I

申请/专利权人:徐 放

发明/设计人:徐 放

主申请人地址:310011浙江省杭州市拱墅区梅苑阁2-1-301

专利代理机构:杭州求是专利事务所有限公司

代理人:韩介梅

国别省市代码:浙江;33

权利要求：

1.一种生产重组人骨形态发生蛋白的方法，其特征是包括以下步骤：1)当含编码重组人骨形态发生蛋白成熟肽序列的质粒转化细菌并诱导表达之后，离心收集细菌；2)将细菌破碎，离心收集包涵体，用洗涤缓冲液反复洗涤包涵体，去除杂质；3)用含变性剂和还原剂的裂解缓冲液连续搅拌裂解包涵体2-8小时；4)将裂解好的包涵体溶液离心，取上清连续缓慢地加入复性缓冲液中做稀释复性，在0-28℃的环境中使之逐步恢复生物活性，复性液蛋白质的终浓度调节在0.02-0.3mg/ml的范围内；5)用层析法分离纯化有生物活性的二聚体。