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一种转糖基α一半乳糖苷酶基因

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本发明公开了一种转糖基α-半乳糖苷酶基因,所述基因由短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)基因组DNA借助PCR扩增获得高保守DNA片段,然后进行Southern杂交获得。该基因核苷酸序列全长2226碱基,编码741个氨基酸。由该基因表达的重组酶特征为:酶为双亚基蛋白,聚合体分子量约为160kD,单亚基分子量约为80kD;酶对对硝基苯酚α-D-半乳糖苷的K<sub>m</sub>为0.17mmol/L,V<sub>max</sub>为4.43μmol/(L·min);酶最适反应温度为37℃,最适反应pH为5.5~6.0;酶在水解蜜二糖或棉子糖的反应体系中具有转糖基活性,反应中有转糖基产物生成;酶广泛的受糖体底物特异性,可用以合成多种α-半乳糖基寡糖及α-半乳糖苷糖缀合物。酶基因的获得,可用于基因改造获得α-半乳糖苷合成酶,从根本上提高α-半乳糖基寡糖及糖缀合物的合成效率。

发明专利

CN200510044898.3

2005-10-11

CN1778928

2006-05-31

C12N15/56(2006.01)I

山东大学

肖 敏;赵 晗;王勤鹏;王 鹏

250100山东省济南市山大南路27号

济南圣达专利商标事务所

郑华清

山东;37

1.一种转糖基α-半乳糖苷酶基因,具有如下特征:(1)具有如SEQIDNo.1所示核苷酸序列,全长2226碱基;(2)由于遗传密码的简并性,具有不同于SEQIDNo.1所示核苷酸序列但与SEQIDNo.1所编码的氨基酸序列相同的核苷酸序列;(3)该基因编码741个氨基酸,序列如SEQIDNo.1所示。
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2006-05-31公开
2006-07-26实质审查的生效
2008-07-02授权
2015-11-25专利权的终止
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