一种基因重组人巨细胞病毒融合蛋白pp150/MDBP及其制备方法与应用

摘要：

本发明公开了一种基因重组人巨细胞病毒融合蛋白pp150/MDBP及其制备方法与应用，涉及基因工程技术、预防性疫苗和诊断试剂等领域。其中所述重组融合蛋白pp150/MDBP，即为人巨细胞病毒pp150蛋白495至691氨基酸片段的197个氨基酸和MDBP蛋白538至601氨基酸片段的64个氨基酸串联形成的融合蛋白；pp150蛋白的197个氨基酸在融合蛋白的N端，MDBP蛋白的64个氨基酸在融合蛋白的C端，两者之间由亮氨酸(Leu)和谷氨酸(Glu)2个氨基酸连接而成，并且融合蛋白的N端增加了1个甲硫氨酸(Met)，融合蛋白全长264个氨基酸。该融合蛋白用于检测人巨细胞病毒抗体或抗原以及用于制备单抗、多抗和蛋白芯片，也可用于制备疫苗、ELISA检测试剂盒和其他相关产品。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200510044398.X

申请日期：2005-08-11

公开/公告号：CN1763203

公开/公告日：2006-04-26

主分类号：C12N15/62(2006.01)I

申请/专利权人:山东省医药生物技术研究中心

发明/设计人:高雪芹;郭大东;韩金祥

主申请人地址:250062山东省济南市历下区经十路89号

专利代理机构:济南圣达专利商标事务所

代理人:郑华清

国别省市代码:山东;37

权利要求：

1.一种基因重组人巨细胞病毒融合蛋白pp150/MDBP，即人巨细胞病毒UL32基因片段编码的pp150蛋白495至691氨基酸片段的197个氨基酸以及UL57基因片段编码的MDBP蛋白538至601氨基酸片段的64个氨基酸串联形成的融合蛋白；pp150蛋白的197个氨基酸在融合蛋白的N端，MDBP蛋白的64个氨基酸在融合蛋白的C端，两者之间由亮氨酸(Leu)和谷氨酸(Glu)2个氨基酸连接而成，并且融合蛋白的N端增加了1个甲硫氨酸(Met)，融合蛋白全长264个氨基酸，其特征在于该融合蛋白C端64个氨基酸选自UL57基因片段编码的MDBP蛋白538至601氨基酸，编码该融合蛋白的基因序列为：ATGCTCGTCTCCCCGCAGGTGACCAAGGCCAGCCCGGGAAGGGTCCGTCGGGACAGCGCGTGGGACGTGAGGCCGCTCACGGAGACCAGAGGGGATCTTTTCTCGGGCGACGAGGATTCCGACAGCTCGGATGGCTATCCCCCCAACCGTCAAGATCCGCGTTTCACCGACACGCTGGTGGACATCACGGATACCGAGACGAGCGCCAAACCGCCCGTCACCACCGCGTACAAGTTCGAGCAACCGACGTTGACGTTCGGCGCCGGAGTTAACGTTCCTGCTGGCGCCGGCGCTGCCATCCTCACGCCGACGCCTGTCAATCCTTCCACGGCCCCCGCTCCGGCCCCGACACCTACCTTCGCGGGTACCCAAACCCCGGTCAACGGTAACTCGCCCTGGGCTCCGACGGCGCCGTTGCCCGGGGATTAGAACCCCGCCAACTGGCCGCGCGAACGCGCGTGGGCCCTCAAGAATCCTCACCTGGCTTACAATCCCTTCAGGTAGCCTACGACTTCCACGGCTTCTCAAAACACCGTGTCCACCACCCCTCGGAGGCCGTCGACTCCACGCGCCGCGGTGACACAAACAGCGTCTCTCGAGTTGGACGGCAAAGGTGACGACGGGGTTCCGGGCGGCGGTGCTGGCGGGGGTGGTGGACGAGACGTGAGCGGGGGCCCGAGCGACGGTCTGGGTGGCGGTCGTGGTGGTGGGGGTGGTGGGGATTCCGGGGGAATGATGGGGCGCGGCGGTCGCATGTTGGGCGCTAGCGTGGACCGTACCTATCGGCTCAATTAA该融合蛋白氨基酸序列为：MetLeuValSerProGlnValThrLysAlaSerProGlyArgValValValAspSerAla5101520TrpAspValArgProLeuThrGluThrArgGlyAspLeuPheSerGlyAspGluAspSer25303540AspSerSerAspGlyTyrProProAsnArgGlnAspProArgPheThrAspThrLeuVal45505560AspIleThrAspThrGluThrSerAlaLysProProValThrThrAlaTyrLysPheGlu65707580GlnProThrLeuThrPheGlyAlaGlyValAsnValProAlaGlyAlaGlyAlaAlaIle859095100LeuThrProThrProValAsnProSerThrAlaProAlaProAlaProThrProThrPhe105110115120AlaGlyThrGlnThrProValAsnGlyAsnSerProTrpAlaProThrAlaProLeuPro125130135140GlyAspMetAsnProAlaAsnTrpProArgGluArgAlaTrpAlaLeuLysAsnProHis145150155160LeuAlaTyrAsnProPheArgMetProThrThrSerThrAlaSerGlnAsnThrValSer165170175180ThrThrProArgArgProSerThrProArgAlaAlaValThrGlnThrAlaSerLeuGlu185190195200LeuAspGlyLysGlyAspAspGlyValProGlyGlyGlyAlaGlyGlyGlyGlyGlyArg205210215220AspValSerGlyGlyProSerAspGlyLeuGlyGlyGlyArgGlyGlyGlyGlyGlyGly225230235240AspSerGlyGlyMetMetGlyArgGlyGlyArgMetLeuGlyAlaSerVlaAspArgThr245250255260TyrArgLeuAsn