一种水牛体细胞克隆的方法

摘要：

一种水牛体细胞克隆的方法，其工艺步骤为：在成熟培养液中添加牛卵泡液和上皮细胞生长因子培养受体卵母细胞，在纺锤体图像系统下去核；用DNA合成的抑制剂Aphidicolin培养处理供体细胞，再饥饿培养；采用离子霉素和6-二甲氨基嘌呤联合激活重组胚，用改良的TCM199加发情牛血清进行胚胎的体外的培养。用本发明的方法进行水牛体细胞克隆，已获得成功，并获得了世界首例成年体细胞克隆水牛。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200510019068.5

申请日期：2005-07-06

公开/公告号：CN1733907

公开/公告日：2006-02-15

主分类号：C12N5/06(2006.01)I

申请/专利权人:广西大学

发明/设计人:石德顺;陆凤花;杨素芳;韦英明

主申请人地址:530004广西壮族自治区南宁市大学路100号

专利代理机构:广西南宁公平专利事务所有限责任公司

代理人:翁建华

国别省市代码:广西;45

权利要求：

1.一种水牛体细胞克隆的方法，其特征是工艺步骤为(1)受体卵母细胞的成熟和去核：在成熟培养液中添加牛卵泡液和上皮细胞生长因子，在纺锤体图像系统下去核；(2)供体细胞的培养处理：用DNA合成的抑制剂Aphidicolin培养处理供体细胞，然后饥饿培养；(3)重组胚的激活和体外培养：采用离子霉素和6-二甲氨基嘌呤联合激活，用改良的组织培养液199号加发情牛血清进行胚胎的体外的培养。