一种硫酸盐还原菌直接倍比稀释PCR快速定量检测方法

摘要：

一种硫酸盐还原菌直接倍比稀释PCR快速定量检测方法，涉及水处理过程中硫酸盐还原菌(SRB)的定量检测方法。现在检测方法存在检测周期较长、不能有效的和即时的指导生产实践和检测费用较高等缺点。本发明依次包括以下步骤：(1).制备“菌体前处理缓冲液”；(2).菌体的制备；(3).倍比稀释；(4).进行冰上的PCR操作；(5).PCR在扩增仪上的扩增；(6).扩增产物于1.0％的琼脂糖电泳检测；(7).结果观察，查表记数。本发明所述方法记数结果准确、可有效的缩短计数时间、真实的反映生产实际情况、降低检测费用，利于推广应用。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200510010459.0

申请日期：2005-10-21

公开/公告号：CN1769472

公开/公告日：2006-05-10

主分类号：C12Q1/25(2006.01)I

申请/专利权人:哈尔滨工业大学

发明/设计人:马 放;魏 利

主申请人地址:150090黑龙江省哈尔滨市南岗区海河路202号（哈工大二校区）

专利代理机构:哈尔滨市松花江专利商标事务所

代理人:张 伟

国别省市代码:黑龙江;23

权利要求：

1.一种硫酸盐还原菌直接倍比稀释PCR快速定量检测方法，其特征在于它依次包括以下步骤：(1).制备菌体前处理缓冲液；(2).菌体的制备；(3).倍比稀释；(4).进行冰上的PCR操作；(5).PCR在扩增仪上的扩增；(6).1.0％的琼脂糖电泳检测；(7).结果观察，查表记数；所述“(4).进行冰上的PCR操作”过程中的PCR反应体系为20μl：包括：Buffer(10×)2μl、0.3mmol·L-1的dNTP2μl、浓度为0.1μmol·L-1的正向引物SRBF1μl、浓度为0.1μmol·L-1的反向引物SRBR1μl，rTaq酶0.3U，其余加去离子水11.7μl，然后加2μl的样品。