一种用于基因扩增的方法

摘要：

本发明提供了一种为高速基因扩增而特别构建的双链DNA，一种利用双链DNA进行基因扩增的方法以及一种生产蛋白质的方法。根据体内基因复制的机制构建了一种诱导高速人工基因扩增的系统(BIR)。构建了包括排列A-B-C和A’-B’-C’或A’-B’-C’的反向排列的双链DNA。A和A’是能进行相互同源重组的双链DNA片段，并且所述DNA片段以反向方向相互排列；B和B’是扩增节段，其中所述基因中的至少一个或另一个含有用于扩增的靶基因；C和C’是能进行相互同源重组的双链DNA片段，其中所述DNA片段以反向方向相互排列，在C和C’之间可以插入任何DNA序列。可以去除B和B’，在这种情况中，A或C可以是用于扩增的靶基因。将双链DNA整合到染色体或质粒内，并且对切割任意的特异序列的酶的诱导诱导特异位点上的断裂，这就启动了高速的基因扩增。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200480034735.0

申请日期：2004-11-12

公开/公告号：CN1886504

公开/公告日：2006-12-27

主分类号：C12N15/00(2006.01)I

申请/专利权人:独立行政法人科学技术振兴机构

发明/设计人:堀内嵩;渡边孝明

主申请人地址:日本埼玉县

专利代理机构:永新专利商标代理有限公司

代理人:林晓红

国别省市代码:日本;JP

权利要求：

权利要求书1.一种包括(a)A-C排列和(b-1)A’-C’排列或(b-2)A’-C’的反向排列的双链DNA，其中A和A’都是双链DNA片段并能进行相互同源重组，并且A和A’中的其中一个是另一个的反向方向；C和C’都是双链DNA片段并能进行相互同源重组，并且C和C’中的其中一个是另一个的反向方向；并且A和C中的至少一个包括用于扩增的靶基因，并且在A、A’、C和C’之间可以插入任何DNA序列。