产生嵌合腺病毒的方法及这种嵌合腺病毒的用途

摘要：

一种提供来自血清型的腺病毒的方法，所述血清型不能在所需细胞系中有效生长，而所述腺病毒具有在所需细胞系中生长的能力。该方法涉及用来自能在所需细胞系中有效生长的腺病毒的对应末端取代腺病毒的左右末端。左末端至少跨越5’末端反向重复，左末端至少跨越E4区域和3’末端反向重复。得到的嵌合腺病毒含有跨越编码五邻体、六邻体和尾丝的基因的内部区域，所述基因来自不能在所需细胞中有效生长的血清型。也提供了构建自新颖的猿腺病毒序列和蛋白的载体、含有相同物质的宿主细胞及其用途。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200480022234.0

申请日期：2004-06-15

公开/公告号：CN1833027

公开/公告日：2006-09-13

主分类号：C12N15/86(2006.01)I

申请/专利权人:宾夕法尼亚州立大学托管会

发明/设计人:S·罗伊;J·M·威尔森

主申请人地址:美国宾夕法尼亚州

专利代理机构:上海专利商标事务所有限公司

代理人:余 颖

国别省市代码:美国;US

权利要求：

1.一种在选择的宿主细胞中有效培养嵌合腺病毒的方法，所述嵌合腺病毒来自不能在所述宿主细胞中有效生长的亲代腺病毒株，所述方法包括以下步骤：(a)产生含有以下物质的嵌合腺病毒：(i)生长在选择的宿主细胞类型中的第一腺病毒的左末端和右末端的腺病毒序列，所述左末端区域含有5’末端反向重复(ITR)，所述右末端区域含有3’末端反向重复(ITR)；和(ii)来自缺少其天然5’和3’末端区域的亲代腺病毒的内部区域，所述内部区域含有编码五邻体、六邻体和尾丝的后期基因；其中得到的嵌合腺病毒从5’到3’含有第一腺病毒的左末端区域、亲代腺病毒的内部区域和第一腺病毒的右末端区域；和b)在存在来自第一腺病毒或来自反补第一腺病毒的腺病毒血清型的功能性腺病毒E1a、E1b和E4ORF6基因以及存在来自腺病毒左末端的必需腺病毒结构基因的情况下培养所述嵌合腺病毒。