siRNA表达系统

摘要：

本发明人描述了可在哺乳动物细胞中正确、稳定并有效表达siRNA的表达系统，其包括：a)来源于U1 RNA基因的聚合酶II RNA-依赖型启动子；该序列下游b)用于克隆转录前-siRNA的序列的合适的限制性位点；所述位点下游c)来源于U1 snRNA基因3’端序列的序列，其对于正确形成前siRNA的3’端是必须且足够的。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200480019454.8

申请日期：2004-07-09

公开/公告号：CN1820074

公开/公告日：2006-08-16

主分类号：C12N15/11(2006.01)I

申请/专利权人:罗马“智慧”大学

发明/设计人:I·博佐尼;M·A·登蒂;A·罗萨

主申请人地址:意大利罗马

专利代理机构:中国国际贸易促进委员会专利商标事务所

代理人:陈轶兰

国别省市代码:意大利;IT

权利要求：

1、用于在哺乳动物细胞中正确、稳定并有效表达siRNA或miRNA的重组载体，其从5’到3’包括：a)来源于U1snRNA基因的RNA聚合酶II依赖型启动子序列；b)用于克隆转录前-siRNA或前-miRNA的序列的合适的限制性位点；c)转录前-siRNA的序列，其包括在第+1位的A或G残基；对应于由将被沉默的基因转录的mRNA有义区域的21到23个核苷酸的序列，其构成前-siRNA茎干的第一个部分；从前-miRNA序列选择的序列，其构成前-siRNA的环状区域；对应于由将被沉默的基因转录的mRNA反义区域的21到23个核苷酸的序列，其构成前-siRNA茎干的第二个部分；两个最后的残基UU，其突出的方式使得得到下列结构：或备选地为转录前-miRNA的序列；d)来源于U1snRNA基因3’端序列的终止序列，其对于正确形成前-siRNA或前-miRNA的3’端是必须且足够的。