DNA扩增方法及其使用的试剂盒

摘要：

一种使用正义引物和反义引物通过PCR扩增DNA的方法，该方法在存在如上附加引物的条件下进行：具有寡脱氧核苷酸的附加正义引物，所述寡脱氧核苷酸具有连接到所述正义引物的5′末端的第一附加序列，以及具有寡脱氧核苷酸的附加反义引物，所述寡脱氧核苷酸具有连接到所述反义引物的5′末端的与所述第一附加序列互补的第二附加序列，其中所述附加序列的Tm值低于所述正义引物和反义引物的Tm值，以及在PCR中最初将退火温度控制在所述附加序列无法退火的水平，然后控制在所述附加序列互相退火的水平。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200480006237.5

申请日期：2004-03-05

公开/公告号：CN1759191

公开/公告日：2006-04-12

主分类号：C12Q1/68(2006.01)I

申请/专利权人:爱科来株式会社

发明/设计人:桥口智史;猪濑健

主申请人地址:日本京都府

专利代理机构:中国专利代理(香港)有限公司

代理人:郭文洁%王景朝

国别省市代码:日本;JP

权利要求：

1.一种包含使用正义引物和反义引物进行PCR扩增DNA的方法，其中PCR在存在如下附加引物的条件下进行：附加正义引物，其包含所述正义引物和一种具有第一附加序列并连接到所述正义引物的5′末端的寡脱氧核苷酸，以及附加反义引物，其包含所述反义引物和一种具有与所述第一附加序列互补的第二附加序列并连接到所述反义引物的5′末端的寡脱氧核苷酸；所述附加序列的Tm值低于所述正义引物和反义引物的Tm值；以及在PCR中退火温度最初设定为所述附加序列无法退火的温度，并在PCR过程中改变至所述附加序列互相退火的温度。