一种黄杆菌微胶囊化方法

摘要：

本发明涉及细胞固定化生物制剂，具体地说是一种黄杆菌微胶囊化方法，可按如下步骤操作，向Na·Alg溶液里加入黄杆菌液体种子，在45℃下，通过9#针头注射器，控制下滴速度60-80滴/分钟，向CS和CaCl₂混合液中滴加，稳定4h，然后在低浓度Na·Alg溶液和柠檬酸溶液中稳定15-20min，以无菌生理盐水水浸泡16h，增殖培养制得微胶囊。本发明对Na·Alg-CS微胶囊组方进行了优化，进行了低浓度Na·Alg囊壁修饰和柠檬酸囊内液化，改善了微胶囊的结构，成功固定了黄杆菌；制备的微胶囊菌剂具有优良的物理和生理特性；本发明使微胶囊被束缚在直径较大的胶珠内部，珠壁多孔，避免了微胶囊的流失。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200410087567.3

申请日期：2004-11-17

公开/公告号：CN1778893

公开/公告日：2006-05-31

主分类号：C12N1/20(2006.01)I

申请/专利权人:中国科学院沈阳应用生态研究所

发明/设计人:李海波;李培军;鞠京丽;张 轶;许华夏

主申请人地址:110016辽宁省沈阳市沈河区文化路72号

专利代理机构:沈阳科苑专利商标代理有限公司

代理人:许宗富%周秀梅

国别省市代码:辽宁;21

权利要求：

1.一种黄杆菌微胶囊化方法，可按如下步骤操作，其特征在于：1)壁材配制：按质量百分比配制2.0-3.0％海藻酸钠的水溶液，灭菌冷却，向其中加入海藻酸钠的水溶液总质量15-30％的黄杆菌液体种子，搅拌均匀；2)芯材配制：按质量百分比配制含0.3-0.7％壳聚糖和1.0-2.5％氯化钙的水溶液，pH＝3.5-5.5，灭菌冷却，备用；3)囊壁修饰液和囊内液化液配制：按质量百分比配制0.05-0.25％海藻酸钠水溶液，灭菌；按照摩尔浓度配制0.045-0.065mol/L柠檬酸水溶液，灭菌；4)微胶囊制备：在40-45℃下，将壁材溶液在无菌条件下按60-80滴/分钟的速度滴入芯材溶液中，不断搅拌；胶珠成型后，稳定4h；然后将胶珠转移到囊壁修饰液和囊内液化液的混合液中，搅拌15-20min，囊壁修饰液和囊内液化液的体积比为1-1.5∶1；取出胶珠用无菌水或无菌生理盐水浸泡6-24h，置于增殖培养基中，增殖培养后制得微胶囊。