一种组成型表达载体及其构建方法与应用

摘要：

本发明公开了一种组成型表达载体及其构建方法与应用，其目的是提供一种组成型表达载体及其构建方法与该表达载体在表达GL-7-ACA酰化酶中的应用。本发明所提供的组成型表达载体，是调节基因被敲除或缺失的诱导型质粒达载体。本发明以pMAL-p2x、pGEX、pMBP、pKK223等含tac启动子的质粒表达载体为模板，在基因lac I^q两端设计引物，PCR扩增除lac I^q基因之外的整个质粒，得到优选的组成型表达载体pMALC。本发明利用上述获得的菌体干重约为1g/L，总蛋白含量约为200mg/L，酶占总蛋白的40～50％，表达的GL-7-ACA酰化酶的量与诱导表达没有显著差别，酶活为220U/L。本发明的组成型表达载体将在外源蛋白(特别是GL-7-ACA酰化酶)的生产中发挥重要作用。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200410083849.6

申请日期：2004-10-20

公开/公告号：CN1763204

公开/公告日：2006-04-26

主分类号：C12N15/63(2006.01)I

申请/专利权人:清华大学

发明/设计人:周 航;于慧敏;罗 晖;沈忠耀

主申请人地址:100084北京市海淀区清华园

专利代理机构:北京纪凯知识产权代理有限公司

代理人:关 畅

国别省市代码:北京;11

权利要求：

1、一种组成型表达载体，是调节基因被敲除或缺失的诱导型质粒达载体。