一种将穿梭质粒导入黄色短杆菌的电转化方法
本发明公开一种能在大肠杆菌和黄色短杆菌中穿梭表达的重组质粒电转化导入黄色短杆菌的快速有效的方法。本发明通过对携带重组质粒的大肠杆菌DH5α在一种特殊的培养基进行培养过程中,将黄色短杆菌菌进行休眠态处理工艺。克服了在大肠杆菌和黄色短杆菌中穿梭表达的重组质粒电转化导入黄色短杆菌的过程中,以大肠杆菌DH5α为宿主菌获得的重组质粒过程中,减少大肠杆菌对穿梭质粒的甲基化修饰作用,以及黄色短杆菌对穿梭质粒的限制性酶切作用,使该穿梭质粒能够通过电转化方法高效地导入黄色短杆菌中,并能稳定复制和传递,电转化效率达到2.0×10<sup>3</sup>。
发明专利
CN200410060200.2
2004-07-07
CN1718732
2006-01-11
C12N15/70(2006.01)I
新疆农业科学院微生物应用研究所
崔春生;谢玉清
830091新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市南昌路38号
新疆;65
1、一种能在大肠杆菌和黄色短杆菌中穿梭表达的重组质粒电转化导入黄色短杆菌的快速有效的方法,其特征在于,通过采用专用培养基对携带重组质粒的大肠杆菌DH5α进行培养,并将目的菌进行休眠态处理。