一种溶葡萄球菌酶工业化纯化工艺

摘要：

本发明公开了一种溶葡萄球菌酶工业化纯化工艺，从含溶葡萄球菌酶基因的球形芽孢杆菌培养上清中纯化溶葡萄球菌酶。该方法包括离子交换和疏水层析，处理45升样品只需2个工作日，总回收率为50％，比活性大于1000U/mg蛋白质，非还原SDS-PAGE电泳结果显示纯度在90％以上。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN200410054248.2

申请日期：2004-09-02

公开/公告号：CN1743453

公开/公告日：2006-03-08

主分类号：C12N9/36(2006.01)I

申请/专利权人:上海高科联合生物技术研发有限公司

发明/设计人:黄青山;陆海荣

主申请人地址:201206上海市浦东金港路501号B座3层

专利代理机构:中原信达知识产权代理有限责任公司

代理人:罗大忱

国别省市代码:上海;31

权利要求：

1.一种溶葡萄球菌酶纯化工艺，其特征在于，包括如下步骤：(1)上样：将电导为3～4ms/cm、pH为6.5～7.0的样品通过预先用缓冲液平衡好层析柱；所说的样品为含溶葡萄球菌酶基因重组质粒的球形芽孢杆菌培养上清；所说的层析柱采用的介质是颗粒大小为100～300μm的强阳离子琼脂糖凝胶；(2)清洗：用10～50mmol/LpH为6.5～7.5的磷酸缓冲液清洗层析柱；(3)洗脱：用含0.5～1mol/L氯化钠的10～50mmol/LpH为6.5～7.5的磷酸缓冲液将蛋白从层析柱上洗脱并收集洗脱峰。