一种农杆菌介导的植物无选择基因转化及无选择标记基因转化方法
本发明涉及一种农杆菌介导的植物无选择基因转化方法,步骤为:构建适用于农杆菌介导的基因转化载体;使用缩小的外植体,这类外植体或外植体的受侵染截面含有1-20个可再生细胞;外植体被通过预处理或预培养,以减少由于农杆菌的作用引起的受侵染细胞的死亡;将这类外植体与农杆菌在营养缺失的条件下共培养;使用抗生素抑制农杆菌的生长;在不含有选择试剂的培养基中诱导外植体愈伤组织;在不含有选择试剂的分化培养基中获得再生植株;通过分子生物学或化学分析鉴定转基因植株;转基因植株在所有再生植株中所占的比例高于20%。
发明专利
CN03117123.0
2003-01-06
CN1515671
2004-07-28
C12N15/09
云南省农业科学院生物技术研究所
王敬乔;李根泽;陈薇;和江明;;寸守铣
650223云南省昆明市学府路(云南省农业科学院生物技术研究所)
昆明正原专利代理有限责任公司
赛晓刚
云南;53
权利要求书1.一种农杆菌介导的植物无选择基因转化及无选择标记基因转化方法,其特征在于所说的无选择是指在基因转化过程中不使用选择试剂对转化的植物细胞或组织进行差别选择,如在转化的T-DNA中不含有选择标记基因,则该方法即为无选择标记基因转化法。