SARS病毒的基因检测试剂盒及检测方法

引用

摘要：

一种SARS病毒的基因检测试剂盒及检测方法，以SARS病毒特异性核酸定量标准品为对照，包括RNA提取，聚合物酶链反应(PCR)扩增及荧光检测，所述的检测方法直接用待测病人的静脉血标本或漱口液或呼吸道分泌物为分析样本，提取出样本中的RNA作为核酸模板，再对核酸模板进行荧光聚合物酶链反应扩增，所用的荧光扩增检测试剂包括一步法RT-PCR缓冲液、脱氧三磷酸核苷(dNTP)混合物、及特异扩增引物及特异探针。这种检测方法快捷，方便，能够尽快确诊病人的分泌物或血液中是否存在SARS病毒，有效减少SARS病毒在人群中传播。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN03117040.4

申请日期：2003-05-16

公开/公告号：CN1468965

公开/公告日：2004-01-21

主分类号：C12Q1/68

申请/专利权人:浙江大学医学院附属第一医院%杭州博赛基因诊断技术有限公司

发明/设计人:李兰娟;姜汉卿;沃健儿;吴南屏;邵俊斌

主申请人地址:310003浙江省杭州市上城区庆春路79号

专利代理机构:杭州天正专利事务所

代理人:王兵%黄美娟

国别省市代码:浙江;33

权利要求：

1.一种SARS病毒的基因检测试剂盒，包括SARS病毒特异性核酸定量标准品，即SARS的部分序列：5’-TACCGTAGACTCATCTCTATGATGGGTTTCAAAATGAATTACCAAGTCAATGGTTACCCTAATATGTTTATCACCCGCGAAGAAGCTATTCGTCACGTTCGTGCGTGGATTGGCTTTGATGTAGAGGGCTGTCATGCAACTAGAGATGCTGTGGGTACTAACCTACCTCTCCAGCTAGGATTTTCTACAGGTGTTAACTTAGTAGCTGTACCGACTGGTTATGTTGACACTGAAAATAACACAGAATTCACCAGAGTTAATGCAAAACCTCCACCAGGTGACCAGTTTAAACATCTTATACC-3’其特征在于所述的试剂盒还包括以下组分：(1)荧光扩增检测试剂：由一步法RT-PCR缓冲液、脱氧三磷酸核苷(dNTP)混合物、特异扩增引物及特异探针以蒸馏水为溶剂混合而成，所述的特异性引物是：引物S1：引物序列为5′-CCAAGTCAATGGTTACCCTAATATGTT-3′引物S2：引物序列为5′-GTTAGTACCCACAGCATCTCTAGTT-3′所述的特异性探针是：探针S3：探针序列为5′-R-AGCCCTCTACATCAAAGCCAATCCACGC-Q-3′R为报告荧光基团，Q为淬灭荧光基团。(2)DNA聚合酶(3)防止污染的尿嘧啶糖基酶(UNG)；(4)用于逆转录的逆转录酶。

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