一种以薄壁离心管为反应容器的聚合酶链式反应方法

摘要：

本发明是对以薄壁离心管为反应容器、使用带加热顶盖基因扩增仪的聚合酶链式反应的改进。其特点是PCR的反应液总体积为0.5-10微升。采用全预混试剂，全预混试剂与样品的加量体积比为1∶1.5至1∶4，反应液中甘油的终浓度为10-20％。PCR的变性温度低，退火温度高，二者之差为10-20℃。变性时间、退火时间和延伸时间三者之和为2-30秒。其引物长度为31-50硷基。本发明PCR反应液体积的超微化和随之的超速化，能通过温度和时间的双重机制来限制非专一产物的扩增，从而提高PCR的稳定性和扩增产物的纯度。在分子生物学研究和临床快速诊断上有广阔的应用和实际意义。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN03100023.1

申请日期：2003-01-06

公开/公告号：CN1515677

公开/公告日：2004-07-28

主分类号：C12P19/34

申请/专利权人:徐定邦%徐文慧

发明/设计人:徐定邦;朱德芬;徐文慧;黄贞华

主申请人地址:201900上海市永兴路58弄2号603室

国别省市代码:上海;31

权利要求：

权利要求书1、一种以薄壁离心管为反应容器的聚合酶链式反应方法，使用带加热顶盖基因扩增仪，其特征在于所说的聚合酶链式反应的反应液总体积为0.5-10微升。