一种万能引物的PCR方法及其反应液和在多重PCR中的应用
本发明提供一种万能引物的聚合酶链式反应方法及其反应液和在多重PCR中的应用,即以一对3’区域与模板互补的前导引物,和一对与前导引物5’区域相同的万能引物在同一PCR反应中进行扩增,正反万能引物序列也可以设计成完全相同。本方法解决了扩增效率受到引物与模板结合效率影响的问题,可应用于多重PCR反应,具有反应特异性强、多重PCR间扩增效率稳定和引物浓度范围大的优点,适合作为常规分子生物学实验室手段和医学核酸检测手段。
发明专利
CN02160387.1
2002-12-31
CN1514006
2004-07-21
C12P19/34
徐定邦%徐文慧
徐定邦;朱德芬;陈有容;徐文慧
200071上海市永兴路58弄2号603室
上海;31
1.一种万能引物的聚合酶链式反应方法,依次包括如下步骤:(1)模板变性;(2)引物退火;(3)DNA聚合酶催化下延伸合成互补DNA链;(4)按步骤(1)-(3)循环进行扩增反应;其特征在于,所用引物包括:一对3’区域与模板互补的前导引物,和一对与前导引物5’区域相同的万能引物。