一种以短杆菌生物合成胞外型胆固醇氧化酶及其转化产物胆甾－4－烯－3－酮的方法

摘要：

一种以短杆菌生物合成胞外型胆固醇氧化酶及其转化产物胆甾－4－烯－3－酮的方法，属微生物酶工程技术领域。以高产菌DGCDC－82在优化条件下发酵，产酶可达700－1000U/L，纯化后比酶活达30U/mg以上。所得酶蛋白分子量为5万道尔顿，全酶含有辅酶FAD，酶活性中心有半胱氨酸存在。在水相/有机相双相体系中该酶可将胆固醇专一地氧化为胆甾－4－烯－3－酮，转化率达92％，转化反应条件温和，快速。试验表明胆甾烯酮对降低小鼠、家兔的胆固醇、血脂和低密度脂蛋白有明显效果，可应用于开发医用酶法测血液胆固醇的试剂盒，低胆固醇且富含胆甾－4－烯－3－酮的保健型食品，医用胆甾烯酮制剂等产品，以填补国内空白。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN01113673.1

申请日期：2001-06-05

公开/公告号：CN1328133

公开/公告日：2001-12-26

主分类号：C12N9/02

申请/专利权人:江南大学

发明/设计人:王武;季文明;陈毅力;吕陈峰;陈亮;韩振芳

主申请人地址:214036江苏省无锡市惠河路170号

专利代理机构:无锡市大为专利事务所

代理人:时旭丹

国别省市代码:江苏;32

权利要求：

权利要求书1.一种胆固醇氧化酶，其特征为以短杆菌(Brevibacterium sp.)突变株DGCDC-82(已保藏在武汉中国典型培养物保藏中心，编号为CCTCC NO.M201008)为产酶菌株，酶蛋白分子量为5万道尔顿，全酶含有辅酶FAD，酶活性中心部位有半胱氨酸残基存在。