一种新型重组葡激酶及其制备方法

摘要：

本发明属生物技术领域，具体涉及一种低聚合能力兼具防栓功能的新型重组葡激酶（ＲＧＤ／ＫＧＤ－Ｓａｋ）的蛋白质结构和制备方法。根据对重组葡激酶单体、二聚体三维结构及其生化特性的分析，设计了新型葡激酶分子结构。通过ＰＣＲ定点突变构建突变体ＲＧＤ／ＫＧＤ－Ｓａｋ基因，然后与原核表达载体ｐＬＹ－４重组，转化大肠杆菌，筛选高表达工程菌。工程菌经发酵扩增，破碎细菌，离心收集包涵体，复性后经二步法纯化ＲＧＤ／ＫＧＤ－Ｓａｋ。所得产品冻干后，形成聚合体的能力显著下降，并能显著抑制ＡＤＰ诱导的血小板的聚集，具有溶栓、防栓双重功能。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN00111627.4

申请日期：2000-01-28

公开/公告号：CN1264736

公开/公告日：2000-08-30

主分类号：C12N9/70

申请/专利权人:上海医科大学

发明/设计人:宋后燕; 宋钢

主申请人地址:200032上海市医学院路138号

专利代理机构:上海医科大学专利事务所

代理人:吴桂琴

国别省市代码:上海;31

权利要求：

权利要求书1、一种新型重组葡激酶，其特征在于：改变野生型Sak二聚体结合面，即47—56位氨基酸（HR1）、104—113位氨基酸（HR2）区的疏水性氨基酸，然后构建重组表达质粒，制备新型葡激酶分子。