乙型肝炎病毒核心和前S1区基因转染的小鼠细胞系（P99－815）及其制备方法

摘要：

本发明涉及乙型肝炎病毒核心和前Ｓ１基因转染而成的小鼠细胞系（Ｐ９９—８１５）的建立，要解决目的基因的分离、连接、克隆、鉴定、构建含目的基因的真核表达载体、转染真核细胞（Ｐ８１５）的技术，表达外源基因细胞的筛选、克隆、以及保存条件的研究等。该细胞系可以用于治疗和预防乙型肝炎药物的评价，其中包括体内和体外两方面，药物作用小鼠后，对诱导小鼠体内细胞免疫水平检测时，用此细胞作为靶细胞，药物直接作用转基因细胞，观察药物对该细胞表达乙型肝炎核心抗原和前Ｓ１抗原的影响等。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN00103431.6

申请日期：2000-03-10

公开/公告号：CN1267725

公开/公告日：2000-09-27

主分类号：C12N15/10

申请/专利权人:中国预防医学科学院病毒学研究所

发明/设计人:赵阳青; 詹美云

主申请人地址:100052北京市宣武区迎新街100号

专利代理机构:三高专利事务所

代理人:姚宝琴

国别省市代码:北京;11

权利要求：

权利要求书1、一种乙型肝炎病毒核心基因（1—144aa）和前S1基因（1—42aa基因）转染小鼠P815细胞后获得的靶细胞系（P99—815），其特征是：乙型肝炎病毒核心和前S1基因均来源于含双拷贝的首尾相连的HBV—DNA（ayw亚型）的质粒pTHBV—1；核心和前S1基因片段是从已构建成功的原核表达载体pET—11dCS1切下后，再与真核表达载体pCDNA3构建成pCDNA3CS1质粒，再将该质粒转染小鼠肥大细胞瘤细胞P815，通过G418筛选获得表达外源基因的细胞系。